本网讯(物质科学与信息技术研究院 洪靖君)近日,我校物质科学与信息技术研究院健康所洪靖君教授课题组在组蛋白研究领域取得重要进展,两项成果分别以“Purification of recombinant histones and mononucleosome assembly”和“Co-expression and Purification of the complex of single-chain H2B-H2A.Z and Histone Chaperone YL1”为题在线发表在方法学类国际著名期刊《Current Protocols》,安徽大学均为唯一作者单位。
核小体是染色质的基本结构单位,由组蛋白八聚体和约147 bp的DNA组成。传统方法中,组蛋白的纯化与制备通常需要借助高效液相色谱(HPLC),但该技术成本高、操作复杂且难以大规模制备。洪靖君教授课题组成功开发了一种不依赖HPLC的重组组蛋白纯化及单核小体组装方法,通过在包涵体中表达和纯化组蛋白,并逐步重构组蛋白八聚体,最终通过透析步骤与DNA组装成核小体。该方法不仅简化了操作流程,还实现了核小体的较大批量制备,为后续相关复合物的制备、结构解析及其生化功能研究提供了有力支持。洪靖君教授为文章的通讯作者兼共同第一作者,硕士研究生赵一鸣为第一作者,此成果入选期刊封面文章。(doi:10.1002/cpz1.70155)。
H2A.Z是组蛋白H2A的变体,在基因转录和基因组稳定性维持中发挥重要作用,分别表达纯化组蛋白及其伴侣的常规方法极为困难。洪靖君教授课题组提供了一种新的表达纯化策略即共表达,同时获得TBZ蛋白与YL1蛋白复合物,并在体内证实了TBZ与YL1存在相互作用,本研究制备的H2B-H2A.Z与YL1复合物为后期解析组蛋白伴侣YL1识别H2A.Z-H2B二聚体的结构机制研究奠定坚实基础。洪靖君教授为文章的通讯作者,洪靖君教授本人、硕士研究生刘玥、博士研究生谭万森参与了相关研究工作。(doi:10.1002/cpz1.70151)
“Purification of recombinant histones and mononucleosome assembly”被选为期刊封面文章(doi:10.1002/cpz1.70159)